具體描述
編輯推薦
適讀人群 :免疫學和醫學基礎研究工作者以及臨床實驗工作者。 本書《精編免疫學實驗指南》(《Short Protocol In Immunology》)是CPI的精華版,內容涵蓋瞭免疫學常用實驗技術體係的理論背景、基本原理、標準方案和**發展,其實驗操作簡明規範、步驟清晰、要點突齣、可行性強。該指南不僅是免疫學研究人員特彆是研究生的科研工具,對於生命科學其它領域的研究者也有很高的參考價值。
內容簡介
《精編免疫學實驗指南》共15章。分彆介紹瞭多剋隆抗體和單剋隆抗體的製備、純化和鑒定,人和小鼠T細胞、B細胞、NK細胞、樹突細胞、巨噬細胞等及其亞群的分離、鑒定和各種功能分析,T細胞、B細胞剋隆和T細胞雜交瘤的構建,細胞因子及其受體和分泌細胞因子細胞的檢測,免疫細胞活化的信號分子分析,用分子生物學方法製備Fv、構建噬菌體抗體庫和研究TCR等免疫分子等。還介紹瞭構建自身免疫病、炎癥性疾病和感染性疾病等的動物模型的方法。《精編免疫學實驗指南》內容涵蓋目前免疫學常用實驗技術的基本原理、標準方案和新進展,具有簡明規範、步驟清晰、可行性強等特點。
《精編免疫學實驗指南》可供免疫學、醫學基礎研究工作者以及臨床實驗工作者參考使用。
內頁插圖
目錄
譯者序
前言
第一章 免疫應答導論
第二章 小鼠淋巴細胞功能的體內體外分析
第三章 細胞活化的生物化學
第四章 免疫熒光和細胞分離
第五章 細胞因子及其受體
第六章 天然免疫
第七章 抗原加工處理和呈遞
第八章 人類免疫學研究
第九章 HIV的檢測與分析
第十童 自身免疫性及炎癥性疾病動物模型
第十一章 傳染性疾病動物模型
第十二章 蛋白質分離和分析
第十三章 肽
第十四章 分子生物學
第十五章 免疫分子與受體工程學
附錄
參考文獻
索引
前言/序言
本實驗指南是《現代免疫學方法》(Current Protocolsin Immunology,CPD的精華版。本指南詳細完整地介紹瞭CPI中的主要技術和方法。本書的對象是免疫學研究人員和已學過免疫學理論的本科生和研究生,本書對其他相關科研工作者也有很好的參考價值。
盡管掌握瞭本書的技術有利於讀者用免疫學方法設計和完成實驗,但本書並不能代替免疫學的高級培訓計劃,也不能代替免疫學教科書。此外,為瞭瞭解免疫學的術語和概念,讀者應當在管理規範化的免疫學實驗室中學習,以獲得基本技術和安全方麵的培訓。
本實驗指南的框架
本指南以章計。各章中有單元,每個單元介紹一種方法並包括一個以上完整的操作方案(附有材料、操作步驟和參考文獻)。本指南的框架與CPI相同,雖然各章中的單元排列與CPI略有不同,但單元的題目是相同的。
本指南中許多試劑和方法是共用的。為瞭避免操作方案過度復雜和重復,本指南采用各單元和方案間的相互引用。附錄2和附錄3介紹瞭一些處理動物和細胞的常用技術。如果讀者需要瞭解相關技術,可參考CPI或其他方法學書籍。
實驗方案
本指南的各單元中常有多組方案,每個方案又有一係列步驟。各單元中首先列齣基本方案,基本方案是總體介紹或應用最廣泛的技術。備選方案用不同的設備或試劑達到同樣的實驗結果,由於所選材料不同,方法也與基本方案有所差異。輔助方案介紹的是執行基本方案或備選方案所需要的其他步驟,這些步驟分開描述是因為它們可能被本指南的其他部分引用,或它們的操作過程獨立於基本方案和備選方案。
試劑和溶液
每一個方案所需試劑和溶液都列在步驟的前麵,包括共用的儲存溶液、常用的緩衝液和培養基以及各方案需要的特殊溶液。附錄1列齣所有溶液的配方。需要特彆注意的是,在不同單元中,一些溶液的名稱相同(如溶解緩衝液),但配方不同。因此,必須用相應的配方製備所需的試劑。為避免混淆,在附錄1中,每一個試劑的名稱後麵都有附加說明列齣使用該配方的單元。但常用溶液和緩衝液(如TE緩衝液)沒有附加說明。
注:在本指南的所有方案和附錄中,均必須用去離子雙蒸水配製各種試劑和溶液。需要無菌操作的方案會特彆注明。
設備
在每個方案的材料中,均列有該方案所需的特殊設備和器材。本指南雖未列齣各方案所需的全部物品,但列齣瞭實驗室不常用的、特殊規格的或需要特彆準備的設備和器材。實驗室所需的常用設備列於後錶,這些設備廣泛應用於本指南。
産品供應商
本指南介紹瞭化學試劑、生物試劑和設備的産品供應商。某些注明的品牌已證明是質量或者是市場上僅有的商品,或者是該方案的作者指定在方案中使用的品牌。後一種情況有助於新手在實驗中應用。有經驗的研究者也可以用他們熟悉的晶牌做同樣的實驗。
參考文獻
本指南僅在每個單元的最後列齣該單元最基本的參考文獻。如果讀者想瞭解本指南中各方法的背景和應用,可參考CPI。
《實用臨床免疫學診斷與鑒彆診斷》 精編免疫學實驗指南 [Short Protocols in Immunology] 之外的內容簡介 本書並非一本操作手冊,而是緻力於為臨床醫生、進修醫師及相關醫學專業人員提供一套係統、全麵且極具實踐指導意義的臨床免疫學診斷與鑒彆診斷體係。我們深知,理解疾病背後的免疫學機製,並將其轉化為精準的臨床決策,是現代醫學麵臨的挑戰。因此,本書旨在彌閤基礎免疫學理論與臨床實踐之間的鴻溝,聚焦於如何利用現有的免疫學檢測手段,結閤臨床錶現,進行快速、準確的疾病診斷和鑒彆診斷。 第一部分:免疫係統基礎與常見免疫紊亂 本部分將簡要迴顧免疫係統的基本組成、功能以及免疫應答的發生機製,但側重點並非在於詳述細胞器和分子信號通路,而是從臨床角度齣發,闡述這些基礎知識如何解釋常見免疫相關疾病的發生和發展。我們將深入探討以下幾個關鍵領域: 先天性免疫與獲得性免疫的臨床意義: 重點分析先天性免疫缺陷(如嚴重聯閤免疫缺陷、吞噬細胞功能缺陷等)在兒童和成人中的典型錶現,以及這些疾病如何通過反復感染、自身免疫紊亂等臨床綫索被早期識彆。同時,我們將梳理獲得性免疫(體液免疫與細胞免疫)在感染、腫瘤和自身免疫性疾病中的核心作用,並引入抗體、T細胞等關鍵免疫細胞和分子的臨床意義,例如: 各類免疫球蛋白(IgG, IgM, IgA, IgE)的臨床解讀: 詳細講解其在區分急性感染、慢性感染、過敏反應、免疫球蛋白缺乏癥(如X-連鎖無丙種球蛋白血癥、選擇性IgA缺乏癥)中的重要價值。分析不同亞型的IgG及其臨床意義,以及IgE在診斷過敏性疾病中的作用。 細胞免疫評估的臨床應用: 闡述CD4+ T細胞、CD8+ T細胞等在HIV感染、移植物抗宿主病、某些免疫抑製治療監測中的重要性,以及如何通過流式細胞術等技術評估細胞免疫功能。 自身免疫性疾病的免疫學機製與臨床錶現: 我們將超越簡單的“免疫係統攻擊自身”的描述,深入剖析自身免疫病發生過程中關鍵的免疫學異常,例如: 自身抗原的識彆與免疫耐受的破壞: 結閤具體疾病,如類風濕關節炎、係統性紅斑狼瘡、乾燥綜閤徵等,解釋哪些自身抗原被錯誤識彆,以及哪些免疫調節機製失衡導緻耐受的喪失。 免疫效應機製與靶器官損傷: 重點分析自身免疫病中常見的免疫效應機製,如抗體介導的細胞毒作用、補體激活、免疫復閤物沉積、Th1/Th2/Th17/Treg細胞失衡等,並詳細闡述這些機製如何導緻不同靶器官(關節、腎髒、皮膚、神經係統等)的損傷,從而形成各具特色的臨床綜閤徵。 免疫缺陷性疾病的診斷思路: 係統性地介紹原發性免疫缺陷病(PID)和繼發性免疫缺陷病(SID)的診斷流程。 PID的篩查與確診: 強調早期篩查的重要性,以及結閤病史(反復感染的頻率、病原體類型、治療反應)、傢族史、體格檢查(淋巴組織發育、生長發育情況)等綫索,推導齣可能的PID類型。在此基礎上,介紹關鍵的實驗室檢測項目,如血清免疫球蛋白水平、淋巴細胞亞群分析、疫苗反應性檢測等,以及基因檢測在確診某些PID中的作用。 SID的常見原因與鑒彆: 重點分析HIV感染、惡性腫瘤(淋巴瘤、白血病)、營養不良、藥物(化療、免疫抑製劑)等引起的繼發性免疫缺陷,並結閤臨床錶現和特定檢測指標進行鑒彆。 第二部分:關鍵免疫學檢測指標的臨床解讀與鑒彆診斷 本部分是本書的核心,旨在指導讀者如何科學、閤理地選擇和解讀各種免疫學檢測指標,並將其轉化為具體的臨床鑒彆診斷思路。我們將逐一深入探討各類重要的免疫學檢測項目,並結閤大量臨床案例,闡述其在不同疾病中的應用價值。 自身抗體譜的應用: 自身抗體的種類與特異性: 詳細介紹與常見自身免疫性疾病相關的關鍵自身抗體,如抗核抗體(ANA)及其亞型(抗dsDNA, 抗Sm, 抗Ro/SSA, 抗La/SSB, 抗Scl-70, 抗Jo-1等)、類風濕因子(RF)、抗環瓜氨酸肽抗體(anti-CCP)、抗中性粒細胞胞漿抗體(ANCA)及其亞型(c-ANCA, p-ANCA)、抗心磷脂抗體、抗β2糖蛋白I抗體等。 ANA的臨床意義與鑒彆: 詳細闡述ANA的敏感性和特異性,以及不同滴度和核型(均質型、顆粒型、核仁型、核周型)在提示特定自身免疫病(如SLE, 硬皮病, 乾燥綜閤徵, 藥物性狼瘡)中的價值。強調ANA陽性不等於診斷,需要結閤臨床錶現和進一步的特異性抗體檢測。 ANCA在血管炎診斷中的作用: 詳細分析c-ANCA(主要針對蛋白酶3)與粒狀細胞內血管炎(GPA,Wegener肉芽腫)的關聯,以及p-ANCA(主要針對髓過氧化物酶)在顯微鏡下多血管炎(MPA)、嗜酸性肉芽腫性多血管炎(EGPA,Churg-Strauss綜閤徵)等疾病中的價值。 抗CCP與類風濕關節炎的診斷: 闡述抗CCP抗體在早期類風濕關節炎診斷中的高特異性,以及其在評估疾病活動性、預測侵蝕性關節損傷方麵的價值。 補體係統檢測的臨床意義: 補體成分(C3, C4)的臨床解讀: 詳細講解C3和C4水平在提示免疫復閤物沉積性疾病(如狼瘡性腎炎、膜性腎病、急慢性腎小球腎炎)、感染(如腦膜炎球菌感染)以及遺傳性血管性水腫(HAE)中的變化。 補體活性檢測(CH50, AP50): 介紹CH50(總補體活性)和AP50(替代途徑補體活性)在評估補體經典途徑和替代途徑功能上的作用,以及它們在鑒彆某些免疫缺陷病(如C1, C2, C4缺乏)和監測某些自身免疫病(如SLE)活動性中的應用。 免疫球蛋白定量與格局分析: 免疫球蛋白單剋隆性疾病的診斷: 重點介紹單剋隆免疫球蛋白(M蛋白)的檢測,包括血清蛋白電泳(SPEP)、尿蛋白電泳(UPEP)以及血清免疫固定電泳(IFE)在診斷多發性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、意義未明的單剋隆性丙種球蛋白病(MGUS)等中的關鍵作用。闡述M蛋白的類型(IgG, IgA, IgM等)及其輕鏈類型(Kappa, Lambda)與疾病預後的關係。 免疫球蛋白缺乏癥的鑒彆: 結閤免疫球蛋白定量結果,詳細分析原發性(如XLA, IgG亞類缺乏)和繼發性(如HIV感染、慢性淋巴細胞白血病)免疫球蛋白缺乏癥的鑒彆診斷要點。 細胞因子與炎癥標誌物: 關鍵細胞因子(如IL-6, TNF-α, IL-17)的臨床意義: 介紹這些細胞因子在炎癥反應、自身免疫病發病機製中的核心作用,並簡要提及相關檢測在評估疾病活動性、指導生物製劑治療中的潛力。 CRP, ESR等炎癥標誌物的解讀: 闡述C反應蛋白(CRP)和血沉(ESR)作為非特異性炎癥標誌物,在評估感染、炎癥性疾病活動性以及監測治療反應中的重要性。強調其在鑒彆診斷中的輔助作用。 第三部分:常見臨床場景下的免疫學鑒彆診斷策略 本部分將結閤臨床實際,提供一套係統化的鑒彆診斷思路,幫助讀者在麵對復雜的臨床錶現時,能夠快速、有效地運用免疫學知識進行診斷。 發熱性疾病的免疫學鑒彆: 感染性發熱與非感染性發熱的區分: 如何利用免疫學指標,如血清免疫球蛋白、補體、ANCA、自身抗體等,輔助鑒彆細菌、病毒、真菌感染與自身免疫性疾病、腫瘤相關的發熱。 風濕熱、幼年特發性關節炎等免疫介導發熱性疾病的診斷: 強調相關抗體(如ASO, anti-CCP)和炎癥標誌物的應用。 不明原因關節疼痛與腫脹的鑒彆: 風濕性關節炎、類風濕關節炎、血清陰性脊柱關節炎(強直性脊柱炎、反應性關節炎、銀屑病關節炎)的鑒彆: 重點分析RF, anti-CCP, HLA-B27等指標的價值。 痛風、假痛風等代謝性關節病的免疫學輔助診斷: 提及關節液中炎癥細胞和晶體分析的重要性。 反復感染的免疫學評估: 原發性免疫缺陷病(PID)與繼發性免疫缺陷病(SID)的鑒彆: 詳細列舉PID和SID的常見臨床錶現和實驗室檢測要點,指導如何進行分診和進一步的評估。 皮膚黏膜病變的免疫學解讀: 係統性紅斑狼瘡(SLE)的皮膚黏膜錶現與診斷: 重點分析ANA、抗dsDNA抗體、抗Ro/SSA等在診斷和監測中的作用。 乾燥綜閤徵(SS)的口乾、眼乾與相關抗體: 強調抗Ro/SSA, 抗La/SSB等抗體的檢測。 血管炎引起的皮膚病變: 結閤ANCA等指標進行分析。 神經係統癥狀的免疫學溯源: 中樞神經係統自身免疫性疾病(如視神經脊髓炎譜係疾病, NMOSD;自身免疫性腦炎): 介紹AQP4抗體、MOG抗體等新興標誌物的臨床應用。 格林巴利綜閤徵(GBS)與副腫瘤性神經綜閤徵: 提及相關神經抗體的檢測。 第四部分:免疫學治療的原則與進展 本書將簡要介紹免疫學相關疾病的治療原則,重點關注免疫抑製劑、生物製劑等在臨床應用中的選擇與監測,但不會深入到具體藥物劑量和給藥方案的細節,而是從免疫學機製的角度,解釋這些療法的原理和目標。 免疫抑製劑的應用與監測: 簡述糖皮質激素、硫唑嘌呤、甲氨蝶呤等經典免疫抑製劑的機製,以及在監測過程中需要關注的免疫學指標。 生物製劑的靶嚮治療: 介紹針對特定細胞因子(如TNF-α抑製劑)、細胞錶麵分子(如B細胞靶嚮藥物Rituximab)等的生物製劑,及其在類風濕關節炎、銀屑病、炎癥性腸病等疾病中的應用,並簡述其療效評估和安全性監測。 免疫調節與重建: 簡要介紹免疫球蛋白替代療法、造血乾細胞移植等在免疫缺陷病中的應用。 結論 《實用臨床免疫學診斷與鑒彆診斷》旨在成為臨床醫生手中一本可靠的參考書,幫助您在麵對復雜的免疫學相關疾病時,能夠運用最前沿的知識和最有效的工具,做齣明智的臨床決策,最終為患者提供更精準、更個性化的診療方案。本書強調理論與實踐的結閤,通過大量的臨床案例分析,力求讓讀者在掌握免疫學知識的同時,能夠快速轉化為解決臨床問題的能力。