内容简介
本书汇总了具有多年生物学实验室工作经验的研究人员在蛋白质相互作用研究方面的经验和心得体会,同时注重吸收借鉴了国际上相关领域最新的进展。
本书从蛋白质相互作用的基本理论开始,到各种经典的蛋白质相互作用的鉴定技术,再到生物信息学的应用,内容涵盖了当前国际上蛋白质相互作用研究领域的各个方面。书中每个章节的基本内容都包括:引言、原理、实验材料、详细步骤、结果分析(实例)、注意要点、疑难分析解答、参考文献。本书编者力求做到深入浅出,让书稿对实验具有实际指导意义。本书的出版能对国内的研究人员在蛋白质功能研究方面做出有益的指导。
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目录
第一部分 蛋白质相互作用概论
第一章 蛋白质与蛋白质相互作用的结构基础
第二章 蛋白质相互作用的定量分析
第二部分 实验方法
第三章 酵母双杂交系统筛选和验证蛋白质相互作用
第四章 细菌双杂交技术
第五章 哺乳动物双杂交
第六章 噬菌体展示技术
第七章 GST沉降实验
第八章 免疫共沉淀(Co-IP)实验
第九章 Far-Westem blotting实验
第十章 蛋白质化学交联
第十一章 串联亲和纯化
第十二章 双向凝胶电泳分析蛋白质复合物
第十三章 用于质谱分析的凝胶分离相互作用蛋白质的样品准备
第十四章 激光共聚焦技术在蛋白质亚细胞定位与蛋白质相互作用中的应用
第三部分 生物信息学在蛋白质相互作用研究中的应用
第十五章 利用计算生物学的方法进行全基因组水平的蛋白质相互作用分析
第十六章 蛋白质相互作用生物信息学检索与预测
第十七章 常用互联网蛋白相互作用数据库资源的使用
精彩书摘
一、引言
随着基因组学、蛋白质组学时代的到来以及对大分子的研究不断深入,我们开始更深入地解释和揭示生命的奧秘。研究人员可以通过实验手段得到几种类型蛋白质与蛋白质相互作用的结构模式,蛋白质晶体结构的研究表明蛋白质相互作用存在着很大的复杂性和多变性。与此相衬,蛋白质结构解析的手段在某些方面已经不能满足要求,现在研究的发展需要对成批量的蛋白质,特别是对蛋白质复合体相互之间的作用模式进行结晶和结构的解析。以前,蛋白质复合物的三维结构仅限于抗原抗体复合物的结构,以及蛋白酶和抑制剂复合物的晶体结构,对于在生物体内更复杂的信号分子传导途径中的蛋白质的相互作用以及它们的晶体结构则研究相对较少。随着近年来研究的深入,对这方面开始有一些初步的研究。目前,结构研究比较普遍的有两类蛋白质复合物,一类是结构域-结构域复合物(domain-domain),即两个预先折叠好的结构域相互作用形成个复合物;另一类是结构域-蛋白质复合物(domain-protein),这类复合物中的一个组分在游离的状态下是线性分子。
人们关于蛋白质与蛋白质相互作用结构基础的了解,一方面来自通过实验手段对这些复合物晶体结构进行解析,明确其相互作用的结构基础;另一方面则来自于理论上的计算和推测,通过对多数蛋白质的疏水性、可接近的蛋白质表面大小、形状以及氨基酸残基特性等结构特点,对蛋白质复合物组分的内部、表面和相互作用的界面这些结构特征进行分析总结,推论相互作用蛋白质表面的一些规律性的特征,并试图通过蛋白质的疏水性去推测它们相互作用的位点。
本章将从总体水乎上对蛋白质-蛋白质相互作用的结构基础进行概括性的阐述,从结构上对其相互作用的机制进行探讨。
前言/序言
在生物学研究的实践过程中,人们逐渐认识到,绝大部分的代谢和调节通路是以蛋白质网络的形式发挥作用,就是说参与组成通路的蛋白质之间存在着广泛而频繁的相互作用。蛋白质与蛋白质相互作用在生物体内具有极其重要的意义,它是蛋白质发挥功能所必需的。各种信号可以在蛋白质相互作用形成的网络之间完成细胞内、外信号的整合和传递,使得细胞在整体水平上对胞内外的信号产生生物学效应。例如,激素和受体、抗原-抗体反应以及酶与抑制剂的作用等等。从某种意义上可以认为,蛋白质的功能就是通过-系列蛋白质-蛋白质相互作用体现出来的。因此,对蛋白质间相互作用的研究一直以来都是生物学研究的一个重要方面。
本书汇总了具有多年生物学实验室工作经验的研究人员在蛋白质相互作用研究方面的经验和心得体会,同时注重吸收借鉴了国际上相关领域最新的进展。
本书从蛋白质相互作用的基本理论开始,到各种经典的蛋白质相互作用的鉴定技术,再到生物信息学的应用,内容涵盖了当前国际上蛋白质相互作用研究领域的各个方面。书中每个章节的基本内容都包括:引言、原理、实验材料、详细步骤、结果分析(实例)、注意要点、疑难分析解答、参考文献。在编写过程中,编者力求做到深入浅出,让书稿对实验具有实际指导意义。作者希望本书的出版能对国内的研究人员在蛋白质功能研究方面做出有益的指导。
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