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內容簡介

　　《病毒的電子顯微學研究》主要介紹研究病毒的各種電子顯微學方法以及*新進展和取得的成果，內容包括：病毒樣品的超薄切片技術，病毒的分離、純化和病毒樣顆粒的組裝，病毒免疫電鏡技術，生物材料的高分辨率電子顯微技術，冷凍電鏡單顆粒技術和冷凍電鏡電子斷層成像技術等。理論介紹盡量做到淺顯易懂，書中示例也取自經典的或者*近幾年的科研成果。此外，在緒論中簡略概述病毒的電子顯微學研究的進展。
　　病毒的電子顯微學研究在近十多年來有許多理論和技術上的突破，發展迅速、成果斐然，其中也有《病毒的電子顯微學研究》部分作者參與的工作，書中均做瞭翔實介紹。
　　《病毒的電子顯微學研究》可供病毒學、結構生物學、流行病學、電鏡等領域的科技工作者，以及高等院校有關專業師生參考。

內頁插圖

目錄

前言

第1章 緒論
1．1 病毒形態、結構和化學組分
1．1．1 電鏡下的病毒形態
1．1．2 病毒的結構
1．1．3 病毒的組分
1．2 病毒分類係統
1．2．1 病毒的主要類群
1．2．2 病毒的分類和命名
1．2．3 病毒分類係統
1．3 病毒入侵、繁殖及病理變化
1．3．1 病毒的入侵
1．3．2 病毒的繁殖
1．3．3 病毒引起宿主細胞的病理變化
1．3．4 病毒的釋放
1．4 病毒的電鏡診斷和鑒定
1．4．1 病毒電鏡診斷鑒定的依據
1．4．2 病毒電鏡診斷鑒定的特點

第2章 病毒樣品的超薄切片技術
2．1 常溫超薄切片技術的取材與固定
2．1．1 取材
2．1．2 固定
2．2 常溫超薄切片技術的脫水、滲透和包埋
2．2．1 脫水
2．2．2 滲透和包埋
2．3 常溫超薄切片的製作和染色
2．3．1 常溫超薄切片的製作方法
2．3．2 染色液和染色方法
2．4 冷凍超薄切片技術
2．4．1 取材、醛固定和包封
2．4．2 冷凍保護處理與冷凍固定
2．4．3 冷凍超薄切片
2．5 冷凍置換技術
2．5．1 冷凍置換的基本原理
2．5．2 冷凍置換介質
2．5．3 冷凍置換的方法
2．5．4 影響冷凍置換的因素

第3章 病毒的分離、純化與病毒樣顆粒的組裝
3．1 病毒的分離純化
3．1．1 病毒的分離
3．1．2 病毒的純化
3．2 病毒純化的超速離心技術
3．2．1 原理與設備
3．2．2 病毒離心純化方法
3．3 病毒衣殼蛋白的體外錶達與病毒樣顆粒的組裝
3．3．1 病毒樣顆粒在大腸杆菌錶達係統中的錶達與組裝
3．3．2 病毒樣顆粒在昆蟲杆狀病毒錶達係統中的錶達與組裝
3．3．3 病毒樣顆粒體外錶達研究進展
3．4 負染色技術
3．4．1 負染色液的製備
3．4．2 染色方法
3．4．3 操作中的注意事項

第4章 病毒免疫電鏡技術
4．1 概述
4．2 抗原-抗體免疫復閤物電鏡技術
4．2．1 吸附法
4．2．2 修飾法
4．2．3 吸附-修飾法
4．2．4 凝集法
4．3 免疫標記電鏡技術的基本方法
4．3．1 取材與固定
4．3．2 免疫標記方法
4．3．3 樣品包埋
4．3．4 對照實驗
4．4 鐵蛋白標記電鏡技術
4．4．1 鐵蛋白標記抗體的製備
4．4．2 鐵蛋白標記電鏡技術的應用
4．5 酶標記電鏡技術
4．5．1 酶標記抗體
4．5．2 PAP技術
4．5．3 酶標記電鏡技術的應用
4．6 膠體金標記電鏡技術
4．6．1 膠體金探針的製備技術
4．6．2 膠體金標記電鏡技術的應用
4．7 電鏡原位雜交技術
4．7．1 同位素標記cRNA探針電鏡原位雜交
4．7．2 生物素標記DNA探針電鏡原位雜交
4．7．3 地高辛標記rRNA探針電鏡原位雜交
4．7．4 電鏡原位雜交技術的注意事項

第5章 生物樣品的高分辨電子顯微技術
第6章 冷凍電鏡單顆粒技術與病毒研究
第7章 電子斷層成像技術與病毒研究
參考文獻
附錄 國際病毒分類係統的科與屬（ICTV，2009年）
圖版

前言/序言

　　許多病毒給人類的健康和生命，以及農、林、牧、漁等産業造成瞭巨大的威脅和災害，如肝炎病毒、艾滋病病毒、SARS冠狀病毒、流感病毒等。據測算，我國有10%人口攜帶乙肝病毒（HBV），有8%～10%慢性乙肝病患者可能發展為肝硬化和肝癌。艾滋病病毒（HIV）引起艾滋病，自1981年發現以來全球纍計有近2000萬人死於艾滋病。可以說這些小小的病毒是人類在生物界中最可怕的敵人！同時，病毒存在的範圍非常廣，幾乎所有的生物體都發現會被病毒所感染。因此，人類有可能利用病毒防治一些有害生物，如利用昆蟲核多角體病毒（NPV）防治農作物害蟲等。此外，病毒又是最簡單、最小的有機體，它明顯地體現齣生物物質的特徵，如生長增殖、遺傳變異及相關的進化過程等。因此，病毒學的研究不單能防治它和利用它防治其他有害生物，而且病毒本身也是研究生命現象和瞭解生命本質的極好的研究材料。病毒學因而成為當前國際科學研究的前沿和熱點。
　　1892年Ivanovski發現瞭煙草花葉病病原體具有過濾性之後，Beijerinck大膽設想這是一種新型的生物因子，病毒就逐漸被人們認識瞭。然而，在三十多年裏，人們隻是把它看成為一種過濾性的緻病因子，仍未引起科學傢們的重視。直至1939年，Kausche首次用電子顯微鏡直接觀察到煙草花葉病毒（TMV），人們纔把病毒看成實在的生物體。此後在相當長的時間內，人們判斷是否是病毒時，其中一個標準是：是否隻有電鏡纔能觀察到。可見電鏡對病毒研究的重要性。
　　目前，電子顯微學方法在病毒學的研究中，無論是病毒形態發生、病理、分類，還是新病毒的發現等研究，都有著非常重要和不可或缺的作用。尤其近二十多年來，生物電子顯微學有瞭飛躍的發展。由於引進瞭高分辨成像技術和計算機圖像處理技術等，以及冷凍技術和生物樣品製備技術的快速發展，一個新學科——生物大分子電子顯微學齣現瞭。特彆是在20世紀90年代齣現瞭冷凍電鏡單顆粒技術和冷凍電鏡斷層掃描技術，它不僅能夠很好保存病毒處於自然狀態而不需要結晶，而且不受病毒尺度大小的限製，並能夠獲得接近原子分辨率的三維結構，在幾年之後其分辨率將會達到原子分辨率，從而使電子顯微學與X射綫晶體學和核磁共振一起成為結構生物學研究的三大手段。
　　但是在很長的時間內，國內很少見到關於病毒電子顯微學研究的書籍，就本人的印象，隻有1961年高尚蔭先生編寫的《電子顯微鏡下的病毒》一書以及近年來幾本有關病理學或分類學方麵的書涉及這方麵的一些內容。這與病毒學發展現狀很不適應。作者長期從事病毒電子顯微學的研究和教學工作，因此決定編寫《病毒的電子顯微學研究》一書。本書主要介紹研究病毒的電子顯微學方法和取得的成果，可供結構生物學、病毒學、流行病學研究者和高等院校有關專業師生參考。
　　本書於2006年由中山大學生命科學學院電鏡室的張景強、李鯤鵬、張勤奮、黃小俊、譚玉蓉、崔金明、陳森雄和柳正完成瞭初稿。由於初稿較粗糙及尚不夠完整等原因未送齣版社。2009年7月科學齣版社來信徵稿，於是我們決定在原來的基礎上重新編寫《病毒的電子顯微學研究》-書。原來的部分作者（張勤奮、崔金明和陳森雄等）因種種原因無法繼續參與本書編寫，於是另邀請硃平、洪健和何鍵等同行參與重新編寫。在此對張勤奮、崔金明和陳森雄等此前所作的努力和貢獻錶示衷心的感謝！北京大學丁明孝教授、南方醫科大學樸英傑教授大力支持本書齣版。同時，本書的齣版得到國傢自然科學基金（項目號U0832604）、科技部蛋白質重大專項（項目號2010CB912404），以及中國科學院百人計劃（項目號KSCX2-YW-R-142）等的資助，在此深錶謝意！
　　本書中所有的圖除標明引用齣處的外，其餘均為作者所有。廣東省微生物研究所何能波、中國科學院武漢病毒所張立人等為本書提供瞭很好的電鏡照片，在此錶示衷心感謝！
　　張景強
　　2010年10月
　　於中山大學
病毒的電子顯微學研究 下載 mobi epub pdf txt 電子書

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