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内容简介

　　《分子生物学基本技术实验指导》共24个实验，分别介绍了组织或细胞总RNA制各和反转录、聚合酶链反应、实时荧光定量PCR、质粒重组与鉴定、淋巴细胞的分离等基因克隆技术，以及将所克隆基因进行转染后的蛋白质表达和转染细胞功能的检测等目前在生物医学研究中比较常用的实验方法。
　　《分子生物学基本技术实验指导》主要供本科高年级及研究生学习使用，以强调分子生物学技术的应用性，同时也可作为青年科技工作者进行科研工作的参考书。

目录

前言
实验一 组织或细胞总RNA制备和反转录
实验二 核酸分子的定量
实验三 聚合酶链反应
实验四 实时荧光定量PCR
实验五 琼脂糖凝胶电泳
实验六 胶回收法纯化DNA
实验七 氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞
实验八 质粒重组、转化、筛选和鉴定
实验九 碱裂解法小量提取质粒DNA
实验十 质粒DNA限制性内切酶实验
实验十一 原核细胞中外源基因的表达和初步纯化
实验十二 十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）
实验十三 真核细胞中外源基因的表达
实验十四 免疫印迹（Western blot）
实验十五 细胞增殖检测
实验十六 肿瘤细胞侵袭转移实验
实验十七 免疫共沉淀实验
实验十八 酶联免疫吸附实验
实验十九 激光扫描共聚焦显微技术
实验二十 焦磷酸测序技术
实验二十一 淋巴细胞的分离
实验二十二 流式细胞实验技术（FCM）
实验二十三 免疫组织化学技术
实验二十四 TUNEL法检测细胞凋亡
主要参考文献

精彩书摘

　　《分子生物学基本技术实验指导》：
　　五、常见问题及解决方法
　　（一）用胶回收试剂盒从凝胶中回收DNA得率低的原因及对策
　　（1）回收前的样品量太少，需加大点样量。
　　（2）紫外灯下切胶时间过长，导致DNA部分降解，应尽量把切胶时间控制在30s以内。
　　（3）胶块体积太大，应使用吸头捣碎，若还不能充分溶解则应先将其切为小块，再分多次回收。
　　（4）胶块溶解不完全，可适当延长水浴时间和上下颠倒的次数及增加溶胶液的比例。
　　（5）电泳缓冲液不新鲜，失去了缓冲能力，导致pH升高，降低DNA和膜的吸附力，应及时更换电泳缓冲液，最好使用新鲜配制的电泳缓冲液。
　　（6）漂洗液使用后未及时盖严瓶盖，乙醇挥发，影响回收效率。
　　（7）洗脱前，预先预热洗脱液、延长室温静置时间、增加洗脱次数可以有效提高回收率30%以上。
　　（8）洗脱液体积过少，说明书提供的最少洗脱体积是能完全覆盖吸附膜的最小体积，应不小于最少洗脱液体积，并将洗脱液加在吸附膜中间。
　　……

前言/序言

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